换一批
换一批aGVHD小鼠血清损伤骨髓间充质干细胞成脂分化能力体外细胞模型的建立与应用
Establishment and Application of an in Vitro Cellular Model of Adipogenic Differentiation of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells with Serum Injury in aGVHD Mouse
摘要目的:借助急性移植物抗宿主病(aGVHD)模型小鼠血清,建立模拟aGVHD骨髓微环境损伤的体外细胞模型,并探究aGVHD小鼠血清对间充质干细胞(MSC)成脂分化能力的影响.方法:以6-8周龄C57BL/6N雌鼠和BALB/c雌鼠分别作为aGVHD模型的供鼠和受鼠.全身照射致死剂量(8.0 Gy,72.76 cGy/min)γ射线后4-6 h内,受鼠经尾静脉输注供鼠来源骨髓细胞(每只1×107),以建立骨髓移植(BMT)小鼠模型(20只);经尾静脉输注供鼠来源骨髓细胞(每只1 ×107)及脾脏淋巴细胞(每只2×106)混合液共0.4 ml,以建立aGVHD小鼠模型(20只).于造模后d 7眼球取血后收集小鼠血清.分离1周龄C57BL/6N雄鼠骨髓来源MSC,分别在培养基中添加2％、5％和10％的BMT小鼠血清和aGVHD小鼠血清培养.通过油红O染色检测两组血清对小鼠MSC体外成脂分化能力的影响;Western blot检测相关蛋白PPARγ、CEBPα的表达水平;实时荧光定量PCR检测成脂关键转录因子PPARγ、CEBPα、FABP4和LPL的表达差异.结果:成功建立了模拟小鼠aGVHD骨髓微环境损伤的体外细胞模型.油红O染色结果表明,与BMT组相比,aGVHD组血清浓度为10％时,橘红色脂滴数目明显减少,MSC成脂分化能力受损;Western blot实验表明,MSC表达成脂相关蛋白PPARγ、CEBPα下调;进一步实时荧光定量PCR检测结果表明,MSC成脂关键转录因子PPARγ、CEBPα、FABP4和LPL生成显著减少.结论:aGVHD小鼠血清抑制MSC成脂分化能力.
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关键词
造血干细胞移植急性移植物抗宿主病骨髓微环境间充质干细胞成脂分化hematopoietic stem cell transplantationacute graft-versus-host diseasebone marrow microenvironmentmesenchymal stem celladipogenesis
分类号
R457.7
栏目名称
间充质干细胞生物学
DOI
10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2025.01.038
发布时间
2025-02-26
基金项目
北京自然科学基金
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国家干细胞重点研发专项
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国家自然科学基金
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