硼替佐米联合重楼皂苷Ⅶ对骨髓瘤细胞增殖、凋亡和氧化应激的影响
Effects of Bortezomib Combined with Polyphyllin Ⅶ on Proliferation,Apoptosis and Oxidative Stress of Myeloma Cells
摘要目的:观察硼替佐米(BTZ)联合重楼皂苷Ⅶ(PP7)对骨髓瘤细胞系ARH-77细胞增殖、凋亡和氧化应激的影响.方法:采用MTT法检测不同浓度的BTZ、PP7单药及两药联合对ARH-77细胞增殖的抑制作用.后续实验分为对照组(不加药)、BTZ(15 nmol/L)组、PP7(1.5 μmol/L)组、BTZ+PP7(15 nmol/L+1.5 μmol/L)组,观察两药对ARH-77细胞形态的影响;流式细胞术检测各组细胞的凋亡率;通过Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染镜下观察细胞的状态,评估细胞活力;Western blot检测凋亡相关蛋白的表达;DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)水平.结果:BTZ、PP7单药及联合用药时均可抑制ARH-77细胞的生长,并呈剂量依赖性(rBTZ=-0.9717,rPP7=-0.9941,rBTZ+PP7=-0.9951),联合用药在一定浓度范围内呈协同作用.与BTZ组和PP7组相比,BTZ+PP7组的凋亡率明显升高(P<0.01),促凋亡蛋白Bax、Smac、P53表达均明显上调(P<0.05),抑凋亡蛋白Bcl-2表达明显下调(P<0.01),Bax/Bcl-2比值明显增大(P<0.01);与对照组相比,BTZ、PP7单药组及BTZ+PP7组ROS水平均明显升高(P<0.05).结论:BTZ联合PP7能够抑制ARH-77细胞的增殖,诱导其凋亡,同时可以增加细胞内ROS水平.
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