换一批高表达造血支持因子的临床级别人脐带间充质干细胞制备及评价策略研究
Preparation and Evaluation of Clinical-Grade Human Umbilical Cord-Derived Mesenchymal Stem Cells with High Expression of Hematopoietic Supporting Factors
摘要目的:制备一种高表达造血支持因子的临床级别人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)并对其干细胞特性进行评价.方法:采集健康产妇足月剖宫产的胎儿脐带组织,机械剥离华通氏胶;采用组织块贴壁培养法和酶消化培养法,联合含有人血小板裂解物的无动物血清培养体系获得hUC-MSC.通过流式细胞术检测两种方法获取的hUC-MSC的表型特征;通过CCK-8和成纤维细胞集落形成实验(CFU-F)检测两组细胞的增殖能力差异;通过成脂、成骨、成软骨的诱导分化,检测两组hUC-MSC多向分化潜能的差异;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测两组hUC-MSC造血支持因子SCF、IL-3、CXCL12、VCAM1和ANGPT1的mRNA表达差异.结果:流式细胞术检测结果表明,两种方法获得的hUC-MSC均高表达CD73、CD90、CD105,低表达CD31、CD45、HLA-DR;CCK-8和CFU-F检测结果表明,组织块贴壁培养法获得的hUC-MSC的增殖能力更强;三系分化实验表明,两组hUC-MSC的多向分化潜能未有明显差异;RT-qPCR检测结果表明,组织块贴壁培养法获得的hUC-MSC造血支持因子SCF、IL-3、CXCL12、VCAM1、ANGPT1的mRNA表达水平更高.结论:在无动物血清培养体系下,成功制备了高表达造血支持因子的临床级别hUC-MSC.
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关键词
脐带间充质干细胞华通氏胶无动物血清培养体系造血支持能力human umbilical cord-derived mesenchymal stem cellsWharton's jellyanimal serum-free culture systemhematopoiesis supporting ability
栏目名称
DOI
10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2025.03.041
发布时间
2025-06-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
北京自然科学基金（7222123）；
北京自然科学基金（L212065）；
北京自然科学基金（7192203）；
国家干细胞重点研发专项（2022YFA1103500）；
国家干细胞重点研发专项（2022YFA1104100）；
国家自然科学基金（82172388）；
国家自然科学基金（82372373）；
国家自然科学基金（81871771）；
国家自然科学基金（81500083）；
国家自然科学基金（81572159）
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