换一批摘要目的:研究Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)对白血病细胞Jurkat细胞株中线粒体数量的调控作用.方法:通过慢病毒包装CRISPR/Cas9-FADD质粒,敲除Jurkat细胞株中的FADD基因.Western blot检测病毒转染的Jurkat细胞中FADD、PGC1-α蛋白水平以及雷帕霉素诱导自噬之后LC3B/β-actin蛋白水平的表达量.并通过回补拯救实验,反向验证FADD对自噬的影响.qPCR对雷帕霉素诱导或氯喹抑制WT Jurkat和FADD-/-Jurkat细胞中mtCO1/β-globin进行相对定量.通过激光共聚焦显微镜和透射电镜分析WT Jurkat和FADD-*-Jurkat细胞不同条件诱导或抑制自噬后线粒体的数量变化.结果:FADD-/-Jurkat细胞株中FADD基因缺失,且PGC1-α蛋白水平无明显变化.与 WT Jurkat细胞相比FADD-/-Jurkat细胞中线粒体数量明显增加.WT Jurkat细胞、FADD-/-Jurkat细胞雷帕霉素诱导自噬之后,线粒体荧光明显减弱且mtCO1/β-globin的mRNA水平也明显下调.WT Jurkat细胞氯喹抑制自噬之后线粒体荧光明显增强且mtCO1/β-globin的mRNA水平明显上调.通过相同处理的细胞样品,透射电镜分析WT Jurkat细胞与FADD-/-Jurkat细胞内线粒体的数量有一样的趋势.结论:在Jurkat细胞中FADD促进自噬发生,FADD被敲除之后线粒体发生堆积,诱导自噬可以减少线粒体数量.
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栏目名称
DOI
10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2026.02.037
发布时间
2026-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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