换一批
换一批利用重组蛋白制备和鉴定分枝杆菌HSP65单克隆抗体
Preparation and identification of monoclonal antibody against a 65KDa heat shock protein from mycobacterium bovis BCG by recombination protein
摘要目的制备针对牛分枝杆菌热休克蛋白65(HSP65)的单克隆抗体(mAb)并进行鉴定.方法以CpGODN1826/Alum为佐剂,不同的HSP65融合蛋白为免疫抗原和检测抗窄,用聚乙二醇(PEG)法制备杂交瘤细胞,ELISA检测杂交瘤细胞分泌抗体的效价和类型,Western blot分析抗体的特异性.结果获得5株稳定分泌抗HSP65蛋白的McAb,3株细胞分泌的mAb为IgG1亚类,2株为IgG2a.ELISA和Western blot结果显示,mAb能特异性结合HSP65-PSA-tag、HSP65-MUC1-tag和HSP65重组蛋白,但与Chaperon-PSA重组蛋白和宿主菌BL21的菌体裂解蛋白不发生结合.结论纯化的重组蛋白可代替的牛分枝杆菌,用于HSP65 mAb的制备和鉴定.获得的HSP65 mAb为HSP65及其重组蛋白的功能研究奠定基础.
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