换一批人自身抗原52-kDRo／SSA，rRNP，Jo-1，SmD1，Scl-70，SSB-La 的原核表达及纯化鉴定
Prokaryotic expression and purification identification of human auto-antigen 52-kDRo/SSA,rRNP,Jo-1,SmD1,Scl-70, SSB-La
摘要目的：制备重组人自身抗原52-kDRo／SSA，rRNP，Jo-1，SmD1，Scl-70以及 SSB-La，为建立自制抗核抗体荧光免疫层析快速检测试剂盒奠定基础。方法在 NCBI 上查询人52-kDRo／SSA，rRNP，Jo-1，SmD1，Scl-70，SSB-La 的碱基序列和氨基酸序列，运用软件预测抗原表位，选择抗原表位并对密码子进行偏嗜性改造，采用人工合成方法合成抗原表位序列并插入至原核表达载体 pET30a 中。将重组质粒导入大肠杆菌 BL21经 IPTG 诱导表达，表达的重组蛋白用镍离子亲和层析柱纯化，用荧光免疫法测定重组蛋白活性。结果重组人自身抗原 SSB-La 是可溶性表达，52-kDRo／SSA，rRNP，Jo-1，SmD1以及 Scl-70是包涵体形式表达；纯化产物经荧光免疫法测定活性，结果显示：SSB-La， Scl-70以及 Jo-1具有较高的抗原活性，52-kDRo／SSA，rRNP 以及 SmD1抗原活性较弱。结论成功制备了重组人自身抗原52-KDRoSSA，rRNP，Jo-1，SmD1，Scl-70以及 SSB-La，为下一步研究开发自制抗核抗体荧光免疫层析快速检测试剂盒奠定了基础。
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关键词
重组人自身抗原抗核抗体抗原表位荧光免疫法ecombinant human autoantigenantinuclear antibodyepitopefluorescence immunoassay assay
分类号
R392.11（医学免疫学）
栏目名称
发布时间
2016-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
广东省教育部产学研结合项目（2012B091100461）
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