换一批
换一批RNAi沉默原代星形胶质细胞IL-17基因表达方法的建立
Establishment of RNAi silencing method of IL-17 gene expression in primary astrocytes
摘要目的 通过基因沉默技术构建质粒成功转染原代星形胶质细胞(Ast)抑制IL-17表达,探讨IL-17的功能.方法 在制备原代Ast基础上,应用IL-17基因沉默质粒pGenesil-1A和B,用Lipofectamine 2000转染Ast,通过荧光分析法、RT-PCR法、Western Blotting法观察IL-17基因沉默后效果.结果 携带pGenesil-1B和A的IL-17基因沉默质粒制备成功后,免疫荧光携带pGenesil-1B转染效果明显高于pGenesil-1A,其转染率可高达56.72％;基因沉默组在转染后72 h内任一时间点IL-17 mRNA表达均低于正常对照组和基因沉默对照组(P＜0.05),且24 h IL-17表达最低(P＜0.05).蛋白表达上,在IL-17基因沉默后3、5、7 d,其蛋白表达仍持续减低(P＜0.05).结论 应用Lipo-fectamine 2000可成功将IL-17 RNAi pGenesil-1质粒转染至原代星形胶质细胞.
更多相关知识
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-4287.2023.10.013
发布时间
2023-11-13
- 浏览5
- 被引0
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
