换一批基于IgY特异性和Fe3O4-MNPs过氧化物酶活性的人载脂蛋白B100检测方法研究
Development of a detection method for human apolipoprotein B100 based on IgY specificity and peroxidase activity of Fe3O4 magnetic nanoparticles
摘要目的 建立一种经济、便捷且特异性好的载脂蛋白B100(ApoB100)检测方法,为冠状动脉硬化及相关疾病的早期诊断提供技术支持.方法 使用ApoB100疫苗免疫高产蛋鸡,制备ApoB100鸡卵黄抗体(ApoB100-IgY).基于磁纳米酶-3,3′,5,5′-四甲基联苯胺显色体系,将Fe3O4磁纳米颗粒(MNPs)和ApoB100-IgY特异性偶联,优化反应条件,建立ApoB100定量检测方法,分析该方法的灵敏度、特异度、重复性以及在模拟样品中的适用性.结果 制得的ApoB100-IgY纯度较高,抗体效价达到1∶512 000,特异性强.反应体系在优化后,确定MNPs-IgY探针的最佳用量为1.5 mg/mL,最佳吸附平衡时间为60 min,最佳孵育温度为37℃.该方法的检测范围为0.01～0.5 mg/mL,未发现与其他血浆蛋白的交叉反应,重复性实验的相对标准偏差(RSD)小于10％,模拟样品的加标回收率为94.8％～109.7％,RSD为7.0％～13.3％.结论 成功建立了一种操作简便、成本低廉且特异性好的ApoB100的检测方法,适用于大样本临床筛查和实验室检测.
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栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-4287.2025.10.016
发布时间
2025-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
吉林省科技发展计划项目（20200403113SF）
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