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鸡白介素17A的克隆表达及活性测定

Cloning and functional characterization of chicken interleukin-17A

摘要从经人工感染柔嫩艾美尔球虫孢子化卵囊(1×104个/只鸡)的盲肠上皮间淋巴细胞(IELs)提取总RNA,用RT-PCR方法成功扩增了鸡白介素17A(IL-17A)基因,测序结果显示,开放阅读框为453 bp,编码150个氨基酸,与GenBank上鸡IL-17A基因(AM773756)的核苷酸和氨基酸序列完全一致(100%),与报道的哺乳动物IL-17A的氨基酸相似性达37%~46%.构建的pGEX-6p1-chIL- 17A原核表达载体经1mmol/L IPTG诱导后表达出43 kDa左右的融合蛋白,与预期大小一致,且Western-blot鉴定表达产物为目的蛋白.功能试验表明,表达的重组鸡IL-17A能够刺激鸡胚成纤维细胞产生IL-6.这些结果表明,鸡IL-17A在结构和功能方面与哺乳动物的IL-17A都有一定的相似性,可能在鸡的免疫应答过程中起到重要的作用.

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分类号 S831S852.4
栏目名称
DOI 10.3969/j.issn.0529-6005.2012.02.001
发布时间 2012-06-27
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