换一批
换一批摘要为了防控猪细小病毒(PPV)感染,本试验利用家蚕杆状病毒表达系统制备PPV病毒样颗粒(VLPs).首先扩增PPV结构蛋白VP2基因,克隆至pFastBac Ⅰ载体中,构建转移载体pFastBac Ⅰ-VP2,将转移载体pFastBac Ⅰ-VP2转化大肠杆菌制备重组杆粒(Bacmid).将Bacmid转染家蚕卵巢(BmN)细胞,制备重组杆状病毒.利用Western blot鉴定VP2蛋白的表达,采用透射电子显微镜观察PPV VLPs形态,血凝试验检测PPV VLPs的效价.将含有PPV VP2基因的重组杆状病毒注射家蚕幼虫制备PPV VLPs,并对家蚕中PPV VLPs进行鉴定.结果显示:BmN细胞样品和家蚕幼虫样品的Western blot检测,均可见64 kDa处存在VP2目的条带;在透射电子显微镜下可观察到约23 nm的PPV VLPs.BmN细胞中制备的PPV VLPs的血凝效价为1∶26,家蚕中制备的PPV VLPs的血凝效价为1∶29,其效价高于BmN细胞中制备的PPV VLPs效价.结果表明,本试验在家蚕中成功制备PPV VLPs,且具有良好的生物学活性,为PPV VLPs疫苗的研发提供了数据支持.
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分类号
S858.28
栏目名称
DOI
10.20157/j.cnki.zgsyzz.2024.07.003
发布时间
2024-07-31
基金项目
国家自然科学基金（31902274）；
国家自然科学基金（31902246）；
国家自然科学基金（32102659）；
河南省重点研发与推广专项基金（222102110312）；
河南省重点研发与推广专项基金（222102110332）
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