换一批HSP70基因对B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞生物学功能的影响
Effect of HSP70 Gene on Biological Function of Eyelid Fibroblasts in B6-Co Mice
摘要为了研究热休克蛋白70(HSP70)基因对C57BL/6J-角膜混浊(B6-Co)小鼠眼睑成纤维细胞生物学功能的影响,本试验将前期研究并验证的siRNA-HSP70转染C57BL/6J(B6)小鼠眼睑成纤维细胞敲低HSP70基因,体外构建HSP70基因过表达载体转染B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞过表达HSP70基因,通过实时荧光定量PCR和Western blot验证转染效率;CCK8法检测B6和B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞的增殖水平;Annexin V-FITC法检测B6和B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞的凋亡水平,Transwell试验检测B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞的迁移能力.结果显示,B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞转染HSP70基因过表达载体后,HSP70在mRNA和蛋白水平的表达均极显著提高(P＜0.01);siRNA-HSP70组B6小鼠成纤维细胞增殖水平极显著低于siRNA-NC组(P＜0.01),凋亡水平显著高于siRNA-NC组(P＜0.05或P＜0.01);pcDNA3.1-HSP70质粒转染组B6-Co小鼠成纤维细胞增殖水平和细胞迁移能力均极显著高于pcDNA3.1-NC组(P＜0.01),凋亡水平极显著低于pcDNA3.1-NC组(P＜0.01).结果表明,B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞转染过表达质粒后,HSP70基因表达显著提高,并显著促进细胞增殖和迁移,抑制细胞凋亡;B6小鼠眼睑成纤维细胞中敲低HSP70基因表达后,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡;故HSP70表达水平显著影响成纤维细胞的生物学行为.
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关键词
热休克蛋白70成纤维细胞过表达细胞增殖细胞凋亡迁移能力heat shock protein 70fibroblastsoverexpressioncell proliferationcell apoptosismigration ability
分类号
Q95-33
栏目名称
DOI
10.20157/j.cnki.zgsyzz.2024.10.003
发布时间
2024-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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