猫杯状病毒实时荧光定量逆转录PCR检测方法的建立

Establishment of Real-time Quantitative Reverse Transcription PCR Detection Method for Feline Calicivirus

二维码有效期 120s

摘要为了建立可快速检测猫杯状病毒(FCV)的方法,本试验采用肽核酸(PNA)设计分子信标荧光探针,优化反应体系和条件,建立了 FCV实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测方法,对该方法的敏感性、特异性和重复性进行验证,并进行临床样本检测.结果显示,建立的RT-qPCR检测FCV参考株具有良好的线性关系(R2=0.999 5),最低检测限为1 × 102 TCID50/mL,对其他相关病毒无有效响应,组内变异系数和组间变异系数均小于1％.应用该方法检测33份临床样本,阳性率为51.5％.由此可见,本试验建立的RT-qPCR敏感性、特异性和重复性均良好,可为FCV的早期快速诊断和疫病防控等提供检测手段.

作者 李静怡 ^[1] 熊雷 ^[2] 黄莉璎 ^[3] 刘晓鹏 ^[1] 杨盛奋 ^[1] 金京勋 ^[1] 王弋 ^[4] 学术成果认领

作者单位 东莞博盛生物科技有限公司,广东东莞 523808 ^[1] 东莞博盛生物科技有限公司,广东东莞 523808;暨南大学药学院,广东广州 510632 ^[2] 广州源博医药科技有限公司,广东广州 510700 ^[3] 东莞博盛生物科技有限公司,广东东莞 523808;广州源博医药科技有限公司,广东广州 510700 ^[4]

关键词猫杯状病毒(FCV)肽核酸(PNA)分子信标荧光探针实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)开放阅读框(ORF)feline calicivirus(FCV)peptide nucleic acid(PNA)molecular beacon fluorescence probe real-time quantitative reverse transcription PCR(RT-qPCR)open reading frame(ORF)

分类号 S852.61 S858.293

栏目名称 研究论文

DOI 10.20157/j.cnki.zgsyzz.2024.12.009

发布时间 2025-01-22

基金项目

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