1株多毒株重组PRRSV的分离鉴定与遗传进化分析

Isolation,Identification and Genetic Evolution Analysis of a Multi-strain Recombinant PRRSV

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摘要为了分析猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)遗传变异特性,本试验对来自山西省某猪场疑似感染PRRSV的母猪血清和仔猪肺脏组织样品进行PRRSV实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测,阳性肺脏组织样品研磨液接种于猪肺泡巨噬细胞(PAMs),将出现细胞病变的PAMs进行有限稀释法纯化后用间接免疫荧光(IFA)鉴定,利用逆转录PCR(RT-PCR)分段扩增分离毒株全基因组序列,并用分子生物学软件进行开放阅读框5(ORF5)基因和全基因组的同源性和遗传进化分析、非结构蛋白2(Nsp2)氨基酸特征及全基因组序列的重组分析.结果显示,qRT-PCR检测样品总阳性率为80%(16/20),从PRRSV阳性仔猪肺脏组织中分离获得1株PRRSV,命名为SXZY202301;分离毒株基因组全长15 021 bp,与NADC30毒株的核苷酸同源性达到90.4%,在遗传进化树中处于同一分支,属于Sublineage 1.8;ORF5基因与IA/2014/NADC34毒株的ORF5基因高度相似,同源性达到了95.1%,在遗传进化树中处于同一分支,属于Sublineage 1.5;分离毒株与类NADC30毒株Nsp2氨基酸序列具有相同的131个氨基酸缺失的典型特征;重组分析结果显示,SXZY202301存在6个重组位点,是以类NADC30毒株为主要亲本,以JXA1毒株和类NADC34毒株为次要亲本的多毒株重组类毒株.本试验为进一步研究PRRSV的重组和演化提供参考.

作者元娜 ^[1] 邵明珠 ^[2] 吕凤霞 ^[3] 窦丽娜 ^[2] 李向清 ^[2] 赵宝凯 ^[2] 董世山 ^[4] 学术成果认领

作者单位河北农业大学动物医学院,河北保定 071000;北京大伟嘉生物技术股份有限公司,北京海淀 100085 ^[1] 北京大伟嘉生物技术股份有限公司,北京海淀 100085 ^[2] 河南牧翔动物药业有限公司,河南郑州 450000 ^[3] 河北农业大学动物医学院,河北保定 071000 ^[4]

关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分离鉴定测序分析遗传进化重组 porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)isolation and identification sequencing analy-sis genetic evolution recombination

分类号 S855.3

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研究论文

DOI 10.20157/j.cnki.zgsyzz.2025.03.008

发布时间 2025-03-25