换一批基于MS2噬菌体的小反刍兽疫装甲RNA质控品的研制
Preparation of MS2 Phage-based Armored RNA Quality Control for Peste des Petits Ruminants
摘要为了研制安全稳定的小反刍兽疫病毒(PPRV)核酸检测质控品,本试验将PPRV检测靶标基因N、MS2噬菌体衣壳蛋白(CP)和成熟酶蛋白A基因序列插入pET28a构建重组质粒pET-CPA-PPR,经表达纯化、去除残余核酸和实时荧光定量PCR鉴定后制备成PPRV装甲RNA质控品,并对其进行电子显微镜观察、定量、耐核酸酶检验、均匀性和稳定性检验,以评估其作为标准物质的可能性.结果显示,pET-CPA-PPR经诱导表达和纯化后形成直径为23～28 nm、大小均一、已包封PPRV检测靶标基因N的装甲RNA颗粒,浓度为2.24×109 copies/μL,可以有效抵抗核酸酶降解作用,均匀性良好且在(37±1)℃条件下可稳定保存至少30 d.结果表明,基于MS2噬菌体制备的PPRV装甲RNA拷贝数高,均匀性和稳定性良好,能够为PPRV核酸检测提供安全可靠的标准化参考物质.
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关键词
小反刍兽疫(PPR)MS2噬菌体装甲RNA病毒样颗粒peste des petits ruminants(PPR)MS2 phagearmored RNAvirus-like particles
分类号
S852.65
栏目名称
DOI
10.20157/j.cnki.zgsyzz.2025.05.005
发布时间
2025-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点研发计划（2022YFD1800500）
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