摘要为了探讨破壁灵芝孢子粉对少弱精子症小鼠的影响,本试验采用网络药理学和动物试验相结合的方法进行研究.网络药理学试验中,首先利用中药系统药理学数据库分析平台(TCMSP)、UniProt数据库收集破壁灵芝孢子粉的靶点,利用GeneCards和OMIM数据库收集少弱精子症的靶点,使用Cytoscape软件构建药物活性成分-疾病靶点网络图,使用STRING数据库绘制蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络图,利用基因功能分类数据库(DAVID)和RStudio软件进行基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,利用AutoDock Tool分子对接技术测定核心活性成分与靶点的结合力.动物试验中,将32只雄性昆明小鼠随机分为空白(BC)组、模型(MC)组、破壁灵芝孢子粉治疗(LZ)组和左卡尼汀治疗(LOS)组,除BC组外,其余各组均连续5 d腹腔注射环磷酰胺[60 mg/(kg·bw·d)]进行造模.造模成功后开始给药,BC组和MC组均按0.1 mL/(10g·bw·d)灌胃生理盐水,LZ组和LOS组分别灌胃给予破壁灵芝孢子粉[393 mg/(kg·bw·d)]和左卡尼汀[393 mg/(kg·bw·d)],连续给药21 d,试验期间每天观察各组小鼠状态;末次给药后30 min,检测小鼠血清中睾酮(T)、促性腺激素释放激素(GnRH)、促黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)含量,测定小鼠精子质量(精子浓度、精子活率、精子活力)、睾丸质量和睾丸器官指数,并通过苏木精-伊红(H.E.)染色观察小鼠睾丸病理变化.网络药理学分析结果显示,破壁灵芝孢子粉与少弱精子症的交集靶点共有21个,且关键靶点与调节激素水平和抗细胞凋亡相关度较高,破壁灵芝孢子粉核心活性成分与关键靶点结合较好.动物试验结果显示,成功构建少弱精子症小鼠模型,与MC组相比,LZ组小鼠状态有所恢复,血清中T和GnRH含量极显著升高(P<0.01),LH和FSH含量极显著降低(P<0.01),精子质量、睾丸质量和睾丸器官指数均显著提升(P<0.05或P<0.01),且睾丸组织结构也得到较好改善,作用效果与左卡尼汀相当.结果表明,破壁灵芝孢子粉可能通过改善小鼠血清性激素水平和抗细胞凋亡,实现治疗少弱精子症的作用.本试验可以为后续治疗少弱精子症相关药物的开发和利用提供一定的参考依据.