胰岛素样生长因子1抑制高糖诱导胃平滑肌细胞凋亡机制的研究
IGF?1 inhibited the apoptosis of gastric smooth muscle cells induced by high glucose through AMPK?Akt?mTOR pathway
摘要目的 探讨胰岛素样生长因子1(IGF?1)对大鼠胃平滑肌细胞凋亡与腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)?蛋白激酶B(Akt)?雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路关键蛋白的影响及相关机制.方法 以体外培养大鼠胃平滑肌细胞为研究对象,分为高糖组(HG组)与HG+IGF?1组.HG组加入葡萄糖至浓度35 mmol/L.HG+IGF?1组加入葡萄糖至浓度35 mmol/L,加入IGF?1至浓度100 ng/ml.流式细胞仪观察细胞凋亡,Western blot法检测B淋巴细胞瘤2基因(Bcl?2)、BCL2关联X蛋白(BAX)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase?3)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶Thr172(p?AMPK Thr172)、AMPK、Akt、mTOR、真核生物细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(4E?BP1)、p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)蛋白表达,抗体芯片观察Akt、结节性脑硬化复合物2(TSC?2)、mTOR、4E?BP1、p70S6K等蛋白不同氨基酸位点磷酸化.结果 与HG组比较,HG+IGF?1组细胞凋亡率、p?AMPK Thr172/AMPK比值、BAX、Caspase?3、Akt、m?TOR蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01),HG+IGF?1组Bcl?2、4E?BP1蛋白表达升高(P<0.05).抗体芯片显示,HG+IGF?1组上调大鼠胃平滑肌细胞Akt、TSC?2、mTOR、4E?BP1、p70S6K等的24个磷酸化抗体表达,稳定1个磷酸化抗体表达.结论 高糖状态下IGF?1通过AMPK调节Akt、TSC?2、mTOR、p70S6K、4E?BP1不同氨基酸位点磷酸化,调节Akt、TSC?2、mTOR、p70S6K、4E?BP1活性与表达,抑制大鼠胃平滑肌细胞凋亡.
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