摘要背景与目的:肝细胞癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一,p53又是重要的抑癌基因,而RNA干扰(RNA interference,RNAi)不仅是一种经济、快捷、高效的抑制基因表达的技术手段,而且有可能在肿瘤基因治疗方面提供新的途径.因此,我们将外源性p53双链小RNA(small double stranded RNA,dsRNA)瞬时转染肝癌SK-Hep-1细胞系,观察其对肝癌细胞P53和P21蛋白表达及细胞周期的影响.方法:合成的p53 dsRNA和EGFP dsRNA,分别以200 ng和400ng的p53 dsRNA用脂质体转染法转染SK-Hep-1细胞,同时设0.9%NaCl空白对照和EG-FP及EGFP+EGFP dsRNA阳性对照组,每组3个复孔,分别在转染24h和48h时用流式细胞仪进行细胞周期检测,对转染p53 dsRNA 48h后应用Western Blot检测P53和P21蛋白的表达,初步探讨p53的dsRNA干扰对肝癌细胞影响的机制.结果:SK-Hep-1细胞在转染200ng p53dsRNA后G0-G1期细胞明显减少,24h时与空白对照相比减少了52.53%,与转染同剂量EG-FP+EGFPdsRNA的阳性对照组相比也减少了50.29%(P＜0.05);S期细胞明显增多,24h时与空白对照相比增加了146.8%,与转染同剂量EGFP+EGFP dsRNA的阳性对照组相比增加了128.62%(P＜0.05);G2-M期细胞也明显增多,24h时与空白对照相比增加了30.56%(P＜0.05),与转染同剂量EGFP+EGFP dsRNA的阳性对照组相比增加了21.63%(P＞0.05).转染400ng p53 dsRNA的SK-Hep-1细胞周期变化也基本相同.转染200ng和400ng p53 dsRNA的SK-Hep-1细胞在48h时,没有检测到P53蛋白的表达,而部分抑制P21蛋白的表达.结论:p53 dsRNA可明显抑制SK-Hep-1细胞P53和部分抑制P21蛋白的表达,并明显促进SK-Hep-1细胞的增殖,其促进细胞增殖作用可能与其抑制细胞P53和部分抑制P21蛋白的表达有关.