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首页 > 中国微生态学杂志 > 从粪便样品中检测动物冠状病毒的分子技术研究

从粪便样品中检测动物冠状病毒的分子技术研究

Detection of the coronavirus from fecal samples with a integrated molecular protocol

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摘要目的感染冠状病毒的动物向环境排毒主要是通过粪便,建立直接从粪便样品对动物冠状病毒进行检测的分子技术具有重要的公共卫生学意义.方法通过计算机模拟和实验方法对已报道的2对针对冠状病毒pol基因的通用引物的通用性进行了验证.不经传统的病毒分离,直接从环境样品中提取病毒RNA,通过一步法RT-PCR进行检测,并通过分子杂交和Nested PCR扩增结合TaqMan探针实时荧光检测的PCR技术,提高对冠状病毒检测的灵敏度和准确度,并对猪、禽冠状病毒感染的临床样品进行分析检测.结果2对引物可以覆盖所有已知的冠状病毒,包括SARS,RT-PCR产物通过测序可以确定冠状病毒种类;实时荧光定量Nested PCR有很高的灵敏度,可以灵敏地检出所有供试的阳性样品,而荧光增量实时监测可以排除凝胶电泳检查的假阳性.结论该研究为从环境中普查和鉴定冠状病毒提供了可靠的技术方法.

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作者 魏桂芳 [1] 张宇镭 [1] 刘惠莉 [2] 赵立平 [1] 学术成果认领
作者单位 上海交通大学生命科学技术学院微生物分子生态与生态基因组学实验室,上海,200240 [1] 上海农业科学院畜牧兽医研究所,上海,201106 [2]
关键词 冠状病毒通用引物TaqMan探针
主题词 病毒(Viruses)粪便(Feces)动物(Animals)研究(Research)环境(Environment)
分类号 R722.6
栏目名称
论著
DOI 10.3969/j.issn.1005-376X.2005.04.004
发布时间 2005-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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中国微生态学杂志

中国微生态学杂志

2005年17卷4期

249-251,253页

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