绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子表达载体pEGFP-C1-hri的构建及鉴定
Construction and identification of expression vector for human ribonuclease inhibitor fused to green fluorescent protein
摘要目的 构建表达绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子的表达载体pEGFP-C1-hri,为探讨人核糖核酸酶抑制因子抗肿瘤作用的分子机制打下基础.方法 用亚克隆法,将目的片段从表达载体pGEX-6p-1-hri克隆到pEGFP-C1上,用双酶切筛选得到阳性重组质粒pEGFP-C1-hri,用脂质体法将其瞬时转染到小鼠黑色素瘤细胞B16中,在荧光显微镜下检测其表达.结果 pEGFP-C1-hri中插入了hri序列,绿色荧光高效表达于B16细胞浆中.结论 pEGFP-C1-hri表达载体已成功构建.
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