换一批
换一批单核增生李斯特菌Internalin A的克隆表达与抗体制备
Cloning, expression and antisera preparation of internalin a from Listeria monocytogenesis
摘要目的 克隆表达单核增生李斯特菌Internalin A(InlA),并以之为抗原制备检测单核增生李斯特菌的抗体.方法 通过 PCR技术从单核细胞增生李斯特菌4b中扩增出inlA基因,克隆筛选和测序鉴定后,最终构建该基因的原核表达质粒pGEX-4T-InlA,谷胱甘肽树脂亲和层析纯化表达产物后,免疫小鼠分别制备相应的多抗和单抗.结果 在大肠埃希菌中成功表达了InlA,并对其进行了纯化,融合表达产物分子量约为110 kD;免疫小鼠获得的抗血清效价达到1:1600;得到了3株抗InlA的单克隆抗体杂交瘤细胞株,腹水单抗效价为1:1×10~5 ～1:3×10~5.2种抗体与其他病原菌均无交叉反应.结论 通过表达单核增生李斯特菌的特异性蛋白制备的抗体,能有效地消除交叉反应,提高检测的特异性.
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栏目名称
论著
发布时间
2010-03-19
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国家863计划专题
973重点计划项目
国家自然科学基金
江西省自然科学基金
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