换一批
换一批双歧杆菌质粒聚合酶基因表达系统的构建及其鉴定
Construction and identification of Bifidobacterium plasmid polyenzyme expression
摘要目的 构建可以在双歧杆菌表达外源性基因的系统.方法 PCR扩增双歧杆菌质粒聚合酶基因(BPP)并连接至质粒pBS-T以形成重组质粒pBS-BPP.PCR扩增双歧杆菌内源性阿拉伯糖苷酶的启动子及分泌性信号肽DNA序列(ara)并连接至质粒pBAD-A以形成重组质粒pBAD-ara,然后将增强绿色荧光蛋白(eGFP)基因连接至质粒pBAD-ara以形成重组质粒pBAD-ara-GFP.采用基因重组技术重组含有ara、BPP、eGFP基因序列并可将外源性基因分泌表达于菌体外及锚定表达于细胞壁的质粒pBS-BPP-ara-GFP,激光共聚焦显微镜下观察含有pBS-BPP-ara-GFP质粒及对照质粒的E.coli,验证eGFP定位表达情况.结果 所构建的表达系统可以在E.coli中表达eGFP基因.结论 通过基因重组方法成功构建了双歧杆菌表达系统,其可将外源基因分泌表达于菌体外.
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关键词
双歧杆菌双歧杆菌质粒聚合酶基因(BPP)ara eGFP外源性基因表达系统BifidobacteriumBifidobacterium plasmid polyenzymeara eGFP exogenous gene expression system
分类号
R378.992
栏目名称
发布时间
2014-01-09
基金项目
广东省自然基金资助课题（04006961,05009077）
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