牛源变栖克雷伯菌噬菌体解聚酶的原核表达及其抗生物膜活性研究
Prokaryotic expression and biological characterization of phage depolymerase from Klebsiella variicola of bovine origin
摘要目的 进行牛源变栖克雷伯菌噬菌体解聚酶的原核表达,并研究其抗生物膜活性,为应用解聚酶防治细菌感染提供依据.方法 通过克隆变栖克雷伯菌噬菌体Y10的解聚酶Dep HYG的基因,构建原核表达载体,并诱导表达、纯化收集重组蛋白.使用96孔板培养变栖克雷伯菌生物膜,测定解聚酶Dep HYG的抗生物膜活性以及与抗生素联用的效果.结果 成功构建原核表达载体,并表达了解聚酶DepHYG重组蛋白.抗生物膜活性试验显示,0.1μg/mL的解聚酶Dep HYG重组蛋白即可显著抑制生物膜形成并有效降解已形成的生物膜.解聚酶Dep HYG蛋白能够增强生物膜中细菌对抗生素的敏感性.与解聚酶Dep HYG联用后,卡那霉素最小杀菌浓度下降至100 μg/mL.结论 解聚酶Dep HYG兼具生物膜抑制与抗生素协同增效功能,可进一步开发基于噬菌体解聚酶和抗生素的联合疗法.
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