换一批致死剂量γ射线照射小鼠脾淋巴细胞凋亡特征及与Bax和Bcl-XL表达的关系
Apoptotic characteristics of spleen lymphocytes in mice irradiated by lethal dose and its relationship to the expression of Bax and Bcl-XL proteins
摘要目的观察致死剂量γ射线照射后小鼠脾淋巴细胞凋亡特征及其与Bax和Bcl-XL表达的关系.方法清洁级C57小鼠225只,随机分为0、6、9、12、15和20 Gy 6个组,经γ射线全身一次照射,于照射前和照射后6 h～28 d活杀取材,用原位末端标记法(TUNEL)和Annexin-V流式细胞术(FCM)检测淋巴细胞凋亡和坏死情况,用碱性磷酸酶免疫组化技术检测Bax和Bcl-XL蛋白的表达.结果①各剂量组小鼠外周血白细胞在照射后6 h出现一过性升高,以后迅速下降.6 Gy照射后7 d降至最低,至照射后28 d基本恢复到正常水平.②不同剂量照射后6 h脾淋巴细胞凋亡率达高峰;照射后6～24 h,≤12 Gy 照射后凋亡率随照射剂量的增加而升高,≥15 Gy照射后凋亡率下降.③FCM检测结果证实,6～12 Gy照射后6 h,脾淋巴细胞凋亡率呈现出量-效关系,≥15 Gy照射后凋亡率下降,而坏死率明显升高.DNA凝胶电泳图谱分析支持上述结果.④照射后6 h, 6 Gy照射后脾淋巴细胞Bax蛋白表达增加,至12 Gy达峰值,显示出量-效关系;≥15 Gy未显示出量-效关系;Bcl-XL蛋白随照射剂量增加而持续降低,在6～12 Gy也显示出较好的量效关系.结论 6～12 Gy照射后脾淋巴细胞死亡方式以凋亡为主,≥15 Gy照射后凋亡与坏死均为淋巴细胞的重要死亡途径.促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-XL在致死剂量照射引起的淋巴细胞凋亡调控中起重要作用.
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