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乳腺癌转移抑制基因BRMS1真核表达载体的构建及鉴定

Construction and identification of eukaryotic expression vector for human breast cancer metastasis suppressor1(BRMS1)

摘要目的:构建乳腺癌转移抑制基因(BRMS1)真核表达载体pcDNA3.1/myc-BRMS1,为研究抑制恶性肿瘤转移的机制奠定基础.方法:设计含有Hind Ⅲ和XhoⅠ酶切位点的一对引物,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从人乳腺癌细胞株MCF-7中扩增到BRMS1的cDNA基因片断,经回收、纯化、酶切后,连接到质粒pcDNA3.1/myc-His(+)A上,鉴定正确后并转染人胚肾细胞HEK-293进行Western blot验证其是否表达.结果:琼脂糖凝胶电泳及基因测序证实重组的pcDNA3.1/myc-BRMS1 cDNA的碱基组成与GenBank中的人BRMS1 cDNA的基因片断组成相同.结论:成功构建了乳腺癌转移抑制基因BRMS1真核表达载体并测序鉴定.

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