lncRNA NEAT1 靶向调控 miR-299-3p对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
Effect of lncRNA NEAT1 targeting regulation miR-299-3p on proliferation,migration and invasion of hepatocellular carcinoma cells
摘要目的:探讨长链非编码(lncRNA)NEAT1对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的实验研究以及作用机制.方法:使用qRT-PCR法检测肝癌细胞中NEAT1和miR-299-3p的表达水平;将阴性对照(si-NC组)、小干扰RNA(si-NEAT1组)、空载体(Vector组)、过表达载体NEAT1(NEAT1组)、共转染si-NEAT1加miR-299-3p抑制物阴性对照(si-NEAT1+anti-NC组)和共转染si-NEAT1加miR-299-3p抑制物(si-NEAT1+anti-miR-299-3p组)转染至Huh7肝癌细胞,使用MTT法检测细胞增殖水平;Western blot测定细胞增殖核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP2)相关蛋白的表达;使用Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力;双荧光素酶检测实验验证NEAT1和miR-299-3p的靶向关系.结果:与正常肝细胞相比,肝癌细胞中NEAT1表达升高(P<0.05),miR-299-3p表达下降(P<0.05).与si-NC相比,si-NEAT1组细胞活性、迁移细胞数、侵袭细胞数降低(P<0.05),PCNA、MMP2蛋白的表达降低(P<0.05).NEAT1 负向调控 miR-299-3p 的表达,与 si-NEAT1+anti-NC 组相比,si-NEAT1+an-ti-miR-299-3p组增加细胞活性、迁移细胞数、侵袭细胞数降低(P<0.05),PCNA、MMP2蛋白的表达增加.结论:沉默NEAT1的表达可以靶向负调控miR-299-3p抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭.
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