大鼠骨髓细胞CD34+β2m-CD90+亚群体外培养诱导分化
Cultivation and inducing-differentiation of rats' bone marrow cells subsets CD34+β2m-CD90+ in virto
摘要目的在体外用HGF+EGF诱导骨髓CD34+β2m-CD90+细胞向成熟肝细胞转化.方法四氯化碳皮下注射建立大鼠肝纤维化模型,磁式细胞分离法取骨髓CD34+β2m-CD90+细胞,流式细胞仪检测;DMEM培养细胞,HGF+EGF诱导分化;免疫荧光显微镜、免疫细胞化学和RT-PCR检测AFP、白蛋白和CK-18的表达;ELISA法检测培养上清白蛋白浓度,PAS染色法检测糖原的合成.结果实验组CD34+,β2m-,CD90+亚群数量均较正常对照组显著增加(P<0.05);诱导分化培养后,细胞的形态与正常肝细胞类似;培养的细胞白蛋白和CK-18的表达随培养时间(第1~21天)的延长而增加,AFP的表达逐渐下降(P<0.05);上清白蛋白浓度,糖原的合成增加(P<0.05).结论大鼠肝纤维化可能促进骨髓CD34+β2m-CD90+细胞的增殖;CD34+β 2m-CD90+细胞经HGF+EGF+SCF诱导分化培养后,在形态和功能上有逐渐向成熟肝细胞转化的趋势.
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