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影响大肠杆菌电转化效率因素的探讨

Discussion on factors affecting electro transformation efficiency of E.coli

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学术成果认领

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摘要目的探讨影响大肠杆菌DH5 a电转化效率的几个关键但易被忽略的因素.方法于室温(25℃)用空气浴振荡和水浴振荡培养大肠杆菌DH5 a,用10%(V/V)甘油-水溶液和10%(V/V)甘油-生理盐水溶液冻存所制感受态细胞.在电压2.5kv、电阻200Ω、电容25μF的条件下进行电转化,电击冰浴(0～10min)后测定转化效率.结果于25℃水浴振荡培养细菌、10%甘油-生理盐水溶液冻存感受态细胞、电转化后冰浴6min,转化效率高速1.01×1010CFU/μg DNA.结论该法适合于大肠杆菌DH5 a,可获得较高的转化效率.

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作者张晓楠 ^[1] 肖玉 ^[2] 黄勇 ^[1] 张秀敏 ^[3] 王涛 ^[1] 王丽 ^[1] 关璐媛 ^[1] 赵玮钦 ^[1] 学术成果认领

作者单位第四军医大学,生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710032 ^[1] 第四军医大学,陕西省军区干休所卫生所,陕西,西安,710032 ^[2] 第四军医大学,病理学教研室,陕西,西安,710032 ^[3]

关键词感受态细胞大肠杆菌DH5 a 电穿孔转化效率

主题词效率(Efficiency)大肠杆菌(Escherichia coli)细胞(Cells)电穿孔(Electroporation)浴(Baths)

分类号 R563

栏目名称

论著

DOI 10.3969/j.issn.1005-8982.2008.04.023

发布时间 2008-05-20

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2008年18卷4期

466-468,472页

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