IL-2/IFN-γ融合蛋白质粒增强HBV DNA疫苗免疫原性的实验研究

Adjuvant effect of IL-2 and IFN-γ fusion protein gene plasmid on HBV DNA vaccination in BALB/c mice

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摘要目的评价IL-2/IFN-y融合蛋白基因质粒(pFP)增强HBVDNA疫苗(pS2.S)免疫原性的佐剂作用.方法构建IL-2/IFN-y融合蛋白和H.BV包膜中蛋白(PreS2+S)编码基因的重组真核表达质粒,根据pFP编码的目的基因序列分子模拟IL-2/IFN-y融合蛋白的空间结构,检测质粒体外转染细胞表达目的基因产物及其生物活性;体内实验采用提高质粒转染效率的在体电脉冲(EP)技术免疫健康BALB/c小鼠,分别以ELISAT及免疫酶联斑点(ELISPOT)方法检测小鼠血清抗HBs及脾脏HBsAg特异性分泌IFN-γ的淋巴细胞应答水平.结果 pFP能够以融合蛋白的形式正确表达IL-2和IFN-γ,其活性域保持相对独立,其分子模拟的结果得到了质粒体外细胞转染检定实验的证实.EP介导的HBV DNA免疫反应中,pS2.S+pFP组血清抗-HBs[(51.2±50.5)mlU/mL,89%]及HBsAg特异性分泌IFN-γ的淋巴细胞应答[(207±103)IFN-rT细胞SFCs/3×105脾细胞,78吲水平和阳性率均显著高于pS2.S+pcDNA3.1组[抗-HBs:(14.8±7.6)mlU/mL,64%;IFN-γ T细胞:(84±70)SFCs/3×105脾细胞,28%(P＜0.05).结论实验结果提示Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ的融合蛋白基因表达质粒可提高HBV DNA疫苗的免疫效果,并促进初始T细胞向Th1方向分化.

作者 杨富强 ^[1] 陈光明 ^[2] 饶桂荣 ^[2] 徐宇虹 ^[3] 赵勇刚 ^[3] 何晓嫱 ^[2] 孙希海 ^[2] 侯金林 ^[4] 学术成果认领

作者单位 南方医科大学南方医院,感染内科,广东,广州,510515;解放军第四五八医院全军肝病中 ^[1] 解放军第四五八医院全军肝病中心,广东,广州,510600 ^[2] 上海交通大学药学院,上海,200030 ^[3] 南方医科大学南方医院,感染内科,广东,广州,510515 ^[4]

关键词 DNA疫苗乙型肝炎病毒(HBV)白细胞介素-2(IL-2)/γ-干扰素(IFN-γ)融合蛋白表达质粒(pFP)在体电转染(EP)DNA vaccine hepatitis B virus (HBV)interleukin-2 (IL-2)/intefferon-γ(IFN-γ) fusion protein expression plasmid (pFP)in vivo electruperation (EP)

主题词蛋白(Egg White)质粒(Plasmids)疫苗(Vaccines)免疫(Immunity)转染(Transfection)

分类号 R-332

栏目名称论著

DOI 10.3969/j.issn.1005-8982.2008.07.002

发布时间 2008-07-14

基金项目

国家高技术研究发展计划(863计划)