换一批
换一批定量PCR检测乙肝病毒DNA实验中变性温度和时间的影响
Effect of denatured temperature and time on quantification PCR detecting HBV
摘要目的 探讨PCR仪温度特性及变性温度、变性时间对实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒的影响.方法 分析比较变性温度范围为88℃-97℃,变性时间分别为5 s和40 s,退火和延伸60℃,40 s,循环数40的实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒的效果.结果 变性温度超过97℃或者变性时间超过40 s.检测到的DNA的量明显降低;变性时间小于20 s,模板含量较低的样本难以检出.结论 变性初期或退火初期PCK温度与程序设置温度偏差较大;变性时间不应超过95℃,否则,检测到的DNA数量将显著降低;变性时间不应小于20 s或超过40 s,否则容易导致假阴性.
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栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1005-8982.2009.23.003
发布时间
2010-03-30
基金项目
国家自然科学基金
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