换一批
换一批HPV 58在宫颈癌组织中的感染分析及其转化基因的克隆
Prevalence analysis of human papilloma virus 58 and cloning of its transforming genes from biopsy samples of cervical cancer
摘要目的 分析中国陕西宫颈癌组织中HPV58的感染情况并克隆其E6、E7主要转化基因.方法 采用HPV GP5+/GP6+通用引物PCR 扩增58例宫颈癌组织DNA粗提物,继之将荧光偏振技术与模板指导的末端延伸反应(TDI-FP)结合,应用探针杂交延伸反应检测HPV58.用特异性引物随机从1例 HPV58 阳性标本中PCK 扩增HPV58 E6、E7基因,将其分别与pGEM-T Easy载体连接,所获得的重组质粒经内切酶消化和测序鉴定.结果 58例宫颈癌标本中10例(17.24%)为HPV 58阳性,克隆获得的HPV 58 E6、E7重组质粒经BLAST分析证实分别含有HPV 58完整的E6、E7基因,与GenBank收录的标准株比较,E6、E7基因分别有5个和2个硷基发生变异,可导致相应的蛋白质氨基酸序列中分别有4个和1个氨基酸替换.结论 中国陕西人宫颈癌组织中HPV 58感染较为多见,且HPV 58 E6和E7转化基因的硷基序列与标准株有所差异.本研究为下一步HPV 58相关肿瘤诊断试剂及疫苗的研制奠定了基础.
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关键词
人乳头瘤病毒58型E6/E7基因荧光偏振克隆宫颈癌type 58 human papilloma virusE6 and E7 genesfluorescence polarizationgene cloningcervical cancer
分类号
K737.33
栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1005-8982.2010.05.002
发布时间
2010-06-30
基金项目
Sci-Tech Program Foundation of Shaanxi Province
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