换一批高胆固醇对小鼠原代成骨细胞Akt/NF-κB信号通路的影响
Effects of high-level cholesterol on Akt/NF-κB signaling pathway of mouse primary osteoblasts
摘要目的 观察高胆固醇对原代成骨细胞Akt/NF-κ B信号通路的影响.方法 将小鼠原代成骨细胞按1×105接种于6孔板上,待细胞融合至80％左右,分别加入0μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml和50μg/ml的胆固醇溶液培养基继续培养24h.采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)的方法,检测成骨细胞核转录因子kappa B(NF-κB)和蛋白激酶B(Akt)的蛋白表达;采用实时荧光定量PCR方法,检测成骨细胞中人白细胞介素1 α(IL-1α)、人白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的信使RNA(mRNA)表达;采用酶联免疫吸附法,检测细胞培养上清中IL-1 α、IL-6和TNF-α的蛋白水平.结果 胆固醇诱导成骨细胞中NF κB的增加和Akt磷酸化水平降低,增加IL-1α、IL-6与TNF-α的mRNA和蛋白表达,且呈一定的剂量依赖性.结论 高胆固醇可以通过Akt/NF-κB信号通路及其介导的炎症因子表达参与成骨细胞的调节.
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DOI
10.3969/j.issn.1005-8982.2016.10.002
发布时间
2016-06-29
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