ADAM17下调影响NK细胞对非小细胞肺癌杀伤作用的实验研究
Effect of the down-regulation of ADAM17 on the killing effect of NK cells in non-small cell lung cancer
摘要目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)下调对自然杀伤(NK)细胞杀伤作用的影响.方法 体外培养人NSCLC A549细胞株,分为正常对照组(未转染)、阴性对照组(转染nonsense siRNA)和ADAM17下调组(转染ADAM17 siRNA).采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组A549细胞ADAM17 mRNA表达,Western blotting检测各组A549细胞ADAM17蛋白表达.制备NK细胞,加入各组A549细胞中,检测NK细胞杀伤活性,Western blotting检测各组细胞中γ干扰素(IFN-γ)、颗粒酶B(GraB)、穿孔素(PFP)蛋白表达.结果 各组细胞ADAM17 mRNA、蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05),正常对照组与阴性对照组细胞ADAM17 mRNA、蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05),ADAM17下调组较正常对照组、阴性对照组降低(P<0.05).各组NK细胞对A549细胞的杀伤活性比较,差异有统计学意义(P<0.05),正常对照组与阴性对照组NK细胞对A549细胞的杀伤活性比较,差异无统计学意义(P>0.05),ADAM17下调组较正常对照组、阴性对照组升高(P<0.05).各组细胞中IFN-γ、GraB、PFP蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05),正常对照组与阴性对照组细胞中IFN-γ、GraB、PFP蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05),ADAM17下调组较正常对照组、阴性对照组升高(P<0.05).结论 NSCLC A549细胞株中ADAM17下调能增强NK细胞的杀伤作用.
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