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LncRNA FEZF1-AS1调控特发性肺间质纤维化的机制研究

Mechanism of LncRNA FEZF1-AS1 regulating idiopathic pulmonary fibrosis

摘要目的 探讨FEZ家族锌指1-反义RNA 1(LncRNA FEZF1-AS1)对肺间质纤维化细胞增殖、迁移、侵袭能力及上皮-间充质相互作用(EMT)的影响及其作用机制.方法 将转化生长因子-β1(TGF-β1)作用于A549细胞,诱导肺间质纤维化细胞模型,将其分为空白对照组(A549细胞组)和模型组.Western blotting检测细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)表达,观察模型复制是否成功;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞LncRNA FEZF1-AS1和miR-200c-3p基因表达.根据实验目的和转染质粒不同,将A549细胞分为空白对照组(Blank组)、TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组、TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组.CCK-8法检测细胞增殖能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell检测细胞侵袭能力.Western blotting检测细胞E-cadherin、N-cadherin及Vimentin蛋白表达;qRT-PCR检测细胞LncRNA FEZF1-AS1和miR-200c-3p基因表达.结果 模型组E-cadherin蛋白相对表达量较空白对照组降低(P<0.05),N-cadherin及Vimentin蛋白相对表达量较空白对照组升高(P<0.05);模型组LncRNA FEZF1-AS1 基因相对表达量较空白对照组升高(P<0.05),miR-200c-3p 基因相对表达量较空白对照组降低(P<0.05).与Blank组比较,TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组细胞增殖、迁移、侵袭能力升高(P<0.05);与TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较,TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组细胞增殖、迁移、侵袭能力降低(P<0.05).与TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较,TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组LncRNA FEZF1-AS1基因相对表达量及N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量降低(P<0.05),E-cadherin蛋白相对表达量升高(P<0.05);与TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较,TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 组和Blank组miR-200c-3p 基因相对表达量升高(P<0.05).结论 LncRNA FEZF1-AS1通过抑制miR-200c-3p促进肺间质纤维化细胞增殖、迁移、侵袭及EMT过程.

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分类号 R563
栏目名称 实验研究·论著
DOI 10.3969/j.issn.1005-8982.2024.09.004
发布时间 2024-06-05
基金项目
国家自然科学基金 山东省中医药科技面上项目
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