摘要目的 探讨microRNA-132-3p(miR-132-3p)靶向Nrf2加重脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的机制.方法 用LPS刺激HUVECs建立体外脓毒症细胞模型,引起内皮细胞损伤.采用CCK-8法测定细胞活力,EdU法检测细胞增殖能力.转染miR-132-3p模拟物/抑制剂后,检测细胞迁移能力、乳酸脱氢酶(LDH)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平.通过荧光素酶报告基因验证miR-132-3p与其靶基因的结合.结果 对照组细胞活力、细胞阳性比高于LPS组(P＜0.05).LPS组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA水平均较对照组升高(P＜0.05),SOD水平较对照组降低(P＜0.05).LPS组miR-132-3p mRNA相对表达量较对照组升高(P＜0.05),Nrf2 mRNA相对表达量较对照组降低(P＜0.05).LPS组Nrf2蛋白相对表达量较对照组降低(P＜0.05).LPS组与LPS+阴性对照组细胞活力比较,差异无统计学意义(P＞0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组细胞活力较LPS组降低(P＜0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组细胞活力较LPS组升高(P＜0.05).LPS组与LPS+阴性对照组迁移细胞数比较,差异无统计学意义(P＞0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组迁移细胞数较LPS组减少(P＜0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组迁移细胞数较LPS组增多(P＜0.05).LPS组与LPS+阴性对照组细胞划痕愈合率比较,差异无统计学意义(P＞0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组细胞划痕愈合率较LPS组降低(P＜0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组细胞划痕愈合率较LPS组升高(P＜0.05).LPS组与LPS+阴性对照组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA和SOD水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05);LPS+miR-132-3p 模拟物组 LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA 水平均较 LPS 组升高(P＜0.05),SOD 水平较LPS 组降低(P＜0.05);LPS+miR-132-3p抑制剂组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA 水平均较LPS 组降低(P＜0.05),SOD水平较LPS组升高(P＜0.05).对照组与阴性对照组Nrf2-WT的荧光素酶活性比较,差异无统计学意义(P＞0.05),miR-132-3p模拟物抑制Nrf2-WT的荧光素酶活性(P＜0.05),miR-132-3p抑制剂增强Nrf2-WT的荧光素酶活性(P＜0.05).各组Nrf2-MUT的荧光素酶活性比较,差异无统计学意义(P＞0.05).LPS组与LPS+阴性对照组Nrf2 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P＞0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组Nrf2 mRNA相对表达量较LPS组降低(P＜0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组Nrf2 mRNA相对表达量较LPS组升高(P＜0.05).LPS组与LPS+阴性对照组Nrf2蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P＞0.05),LPS+miR-132-3p 模拟物组 Nrf2 蛋白相对表达量较 LPS 组降低(P＜0.05),LPS+miR-132-3p 抑制剂组Nrf2蛋白相对表达量较LPS组升高(P＜0.05).结论 miR-132-3p通过下调Nrf2的表达加重了 LPS诱导的内皮细胞损伤,miR-132-3p可能是治疗脓毒症的潜在的新靶点.