换一批用SiRNA沉默SSAT基因表达降低人A549肺癌细胞对抗癌多胺类似物CPENSpm的敏感性
Silence of Spermidine/Spermine N1-Acetyltransferase Expression by SiRNA Decreases Sensitivity of Human A549 Lung Cancer Line to Antitumor Polyamine Analogue CPENSpm
摘要目的 探讨精脒/精胺乙酰转移酶(Spermidine/Spermine N~1-Acetyltransferase,SSAT)基因表达沉默对多胺类似物CPENSpm抗瘤活性的影响.方法 用SiRNA技术获得SSAT基因表达沉默的人A549肺癌细胞株,QT-RT-PCR法用于分析SSAT基因的表达水平,MTT法检测细胞的存活率,DNA片段化分析和流式细胞/亚凋亡峰分析检测细胞凋亡状况.结果 成功获得SSAT基因表达沉默的人A549肺癌细胞株.用10 μmol·L~(-1) CPENSpm处理对照细胞24h可使SSAT mRNA水平升高23倍,但在SSAT表达沉默的细胞中CPENSpm无此影响.细胞增殖实验发现,SSAT表达沉默的细胞对CPENSpm (0～20 p·mL~(-1))的药物敏感性显著性低于对照细胞.细胞凋亡分析发现,10 μmol·L~(-1) CPENSpm处理细胞48 h导致对照细胞出现凋亡细胞典型的DNA片段化现象和亚凋亡峰,但在SSAT表达沉默的细胞株中,CPENSpm诱导细胞凋亡的能力明显减弱.结论 CPENSpm诱导肿瘤细胞内SSAT高表达可能是其抗癌药理活性的分子基础之一.
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