臭氧氧化预处理对大鼠肝脏缺血再灌注细胞凋亡的影响
Effects of Ozone Oxidative Preconditioning on Apoptosis Induced by Hepatic Ischemia Reperfusion Injury in Rats
摘要目的 观察O3氧化预处理对大鼠肝脏缺血再灌注后细胞凋亡的影响,探讨O3对肝脏的保护作用及其可能的作用机制.方法 将18只SD大鼠((♂),6~8周龄,250~280 g)随机分为3组:O3预处理组(OP+IR组)、单纯缺血再灌注组(IR组)和假手术组(S组),每组6只.O3预处理组每天同一时间点行腹腔注射O3/O2混合气体(O3浓度为50 μg·mL-1,1 mg·kg-1·d-1),连续注射5d.S组和IR组则注射相等容积的O2.缺血45 min后恢复灌注3h建立70%肝脏缺血再灌注模型(S组仅开腹不阻断肝血流),取左肝叶组织,HE染色观察肝组织形态学变化,TUNEL法测定肝细胞凋亡指数(AI),免疫组化法测定凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达量的变化,并计算Bcl-2/Bax比值.结果 与S组比较,OP+IR组与IR组的肝组织电镜观察皆有损伤,OP+IR组的损伤程度较IR组减轻;与S组相比,OP+IR组和IR组的肝细胞凋亡指数增加,Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达增加,Bcl-2/Bax比值下降(P均<0.05);与IR组相比,OP+IR组的肝细胞凋亡指数降低,Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白减少,Bcl-2/Bax比值增加(P均<0.05).结论 O3氧化预处理可以显著减轻大鼠肝脏缺血再灌注后肝细胞的凋亡,其作用机制可能与升高Bcl-2蛋白表达、降低Bax蛋白表达从而上调Bcl-2/Bax比例有关.
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