基于蛋白质稳定性分析系统和微量热泳动技术分析不同企业人促红素的生物活性差异

Differences of Biological Activity of Erythropoietin from Different Companies Based on Protein Stability Analysis and Micro-scale Thermophoresis Technique

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摘要目的探讨不同企业人促红素(erythropoietin,EPO)原液热稳定性及其受体亲和力的强弱,结合体内、体外活性试验结果,验证不同企业制剂的生物活性差异.方法利用蛋白质稳定性分析系统测定在25～95 ℃升温过程中不同企业EPO样品的热变性温度(Tm)、粒径、多分散系数(polymer dispersity index,PDI)及变化情况;利用微量热泳动(micro-scale thermophoresis,MST)技术测定各企业EPO与其受体作用时的解离平衡常数(KD);利用Pearson检验对8家企业数据进行相关性分析.结果 8 家企业 EPO 样品Tm为 54.84～59.64 ℃,粒径为 3.71～4.93 nm,PDI 为 0.15～0.19,KD为 41.37～301.40 nmol·L-1,样品粒径在升温过程中均未出现剧烈变化.其中F和H企业样品热稳定性较差,与EPOR受体亲和性较差;D企业样品热稳定性最好,与EPOR受体亲和性最好.结论各企业EPO原液的分子间亲和力与其热稳定性高度相关,也与其生物活性高度相关.MST技术可用于EPO药物的生物活性分析,结合蛋白质稳定性分析系统,为蛋白类药物的生物活性评价和稳定性评价提供新的思路.

作者李佳奇 ^[1] 何睿 ^[2] 张一童 ^[3] 邬忠康 ^[4] 刘贝贝 ^[4] 刘海静 ^[5] 王嫦鹤 ^[5] 学术成果认领

作者单位陕西省食品药品检验研究院,西安 710065;陕西中医药大学,陕西咸阳 712046 ^[1] 西安交通大学附属红会医院药剂科,西安 710054 ^[2] 陕西中医药大学,陕西咸阳 712046 ^[3] 诺坦普科技有限公司,北京 100027 ^[4] 陕西省食品药品检验研究院,西安 710065;陕西中医药大学,陕西咸阳 712046;陕西省食品药品安全监测重点实验室,西安 710065 ^[5]

关键词人促红素热稳定性微量热泳动技术亲和力生物活性 erythropoietin thermal stability micro-scale thermophoresis(MST)technique receptor affinity biologic activity

分类号 R945

栏目名称

生物制药稳定性研究

DOI 10.13748/j.cnki.issn1007-7693.20232380

发布时间 2024-12-18

基金项目

陕西省创新能力支撑计划项目（2020PT-041）；陕西省社会发展科技攻关项目（2021SF-304）