摘要目的 基于系统药理学、临床研究和体外试验探索舒肝益脾颗粒(无糖型)抗非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用机制.方法 临床检测23例NAFLD患者用药后肝脏衰减指数、游离脂肪酸和血脂水平;血浆代谢组学检测患者入血成分和差异代谢物;TCMSP、GeneCards等数据库筛选药物成分和疾病靶点,蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络筛选核心靶点,根据药物-成分-靶点-通路-疾病网络图各节点的度值筛选主要活性成分;AutoDockTools对核心靶点和主要活性成分进行分子对接;结合网络药理学结果和文献分析,筛选出舒肝益脾颗粒(无糖型)主要活性成分槲皮素、山柰酚进行初步细胞验证试验.结果 网络药理学预测结果显示,舒肝益脾颗粒(无糖型)主要有效成分包括槲皮素、山柰酚等60种,核心靶点显著富集于PI3K-AKT信号通路.舒肝益脾颗粒(无糖型)临床疗效显示其能明显改善患者肝脏硬度和脂肪衰减,显著降低患者体内游离脂肪酸和血脂水平等;血浆代谢组学分析中,槲皮素和山柰酚是显著上调的差异代谢物.体外验证实验显示槲皮素、山柰酚能有效抑制细胞内脂肪酸摄取、减少NAFLD细胞模型中的脂质沉积,并降低三酰甘油(triglyceride,TG)含量,上调PI3K-AKT信号通路中p-PI3K/AKT、p-AKT/AKT的表达.结论 舒肝益脾颗粒(无糖型)对NAFLD患者肝脏脂质代谢有改善作用,槲皮素和山柰酚是舒肝益脾颗粒(无糖型)防治NAFLD的关键活性成分,PI3K-AKT信号通路是预测的主要信号通路.槲皮素、山柰酚可抑制游离脂肪酸诱导的HepG2细胞内脂肪酸摄取,降低NAFLD细胞模型内脂质积累和TG含量,其可能通过促进PI3K-AKT信号通路蛋白磷酸化缓解NAFLD.