换一批组织工程角膜生物材料载体制备的比较性研究
A COMPARATIVE STUDY ON BIOCOMPATIBILITY OF ACELLULAR CORNEAL STROMA MATERIALS PREPARED BY SERIAL DIGESTION METHODS
摘要目的比较用不同的方法脱细胞处理异种(猪)角膜基质制备组织工程角膜支架材料,并对其生物相容性进行研究.方法成年York猪角膜基质材料,以Triton联合0.25%胰酶,处理30 min～3 h为材料1;Triton联合DNA-RNA酶,处理8～14 h为材料2;Triton联合0.25%胰酶、DNA-RNA酶,处理3～5 h为材料3.3种材料用无水氯化钙脱水干燥保存.在材料上接种兔角膜基质成纤维细胞,观察细胞生长情况.新西兰大白兔24只,随机分为3组,每组8只.右眼为实验眼,左眼为空白对照眼.将材料植入兔眼角膜基质层中,术后每日裂隙灯检查术眼;1、4、8和12周分别随机取2只兔眼角膜作HE染色,观察材料的生物相容性.结果材料1、2细胞脱出不完全,处理最佳时间分别是2 h和10～12 h,角膜基质网状间隙无明显增大;接种兔角膜基质成纤维细胞后,3～4 d细胞死亡;植入兔角膜基质中有明显的免疫排斥反应.材料3脱出细胞完全,其脱细胞处理的最佳时间为4 h,角膜基质纤维结构无破坏,呈三维网状结构,网状间隙明显增大;接种兔角膜基质成纤维细胞后,细胞在材料上贴附生长良好;将其植入兔角膜基质中无炎性及排斥反应,可逐渐降解吸收,有良好的生物相容性.结论 Triton联合0.25%胰酶、DNA-RNA酶法处理的异种(猪)角膜基质具有良好的生物相容性,可作为一种组织工程角膜的支架材料.
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