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重组人骨形成蛋白2诱导脂肪成体干细胞向软骨分化的形态学研究

A MORPHOLOGICAL STUDY OF CHONDROGENESIS BY ADIPOSE-DERIVED ADULT STEM CELLS INDUCED BY RECOMBINANT HUMAN BONE MORPHOGENETIC PROTEIN 2

摘要目的 探索分离培养兔脂肪成体干细胞,经重组人骨形成蛋白2(recombinant human bone morpbogenetic protein 2,rhBMP-2)定向诱导后,向软骨细胞分化的可能.方法 将4月龄新西兰兔脂肪组织机械分割,通过Ⅰ型胶原酶消化后得到脂肪成体干细胞(adipose-derived adult stem cells,ADASCs),采用微球方法进行培养,在rhBMP-2诱导组、重组人转化生长因子β1(recombinant human transforming growth factor β1,rhTGF-β1)诱导组和rhBMP-2+rhTGF-β1(共同诱导组)干预6 d后,各组诱导液中分别加入维生素C 50μg/ml,再干预8 d,应用HE、Alcian blue、Von kossa染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色等组织学方法对诱导后的细胞进行鉴定.结果 连续诱导培养14 d后,各诱导组HE染色显示软骨陷窝形成,对照组软骨陷窝形成不明显.Alcian blue染色见细胞基质中富含蛋白多糖,胞外基质分泌较多的Ⅱ型胶原;但Von kossa染色为阴性;对照组均为阴性.结论 在微球方法培养下,通过相关形态学研究表明,rhBMP-2具有诱导脂肪成体干细胞向软骨细胞分化的能力,将为采用ADASCs修复软骨损伤奠定理论基础.

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中国修复重建外科杂志

中国修复重建外科杂志

2006年20卷8期

845-848页

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