基因修饰的生物可降解人工骨修复骨缺损的血管化研究
VASCULARIZATION IN TRANSPLANTATION OF GENE MODIFIED TISSUE ENGINEERED BONE FOR REPAIRING BONE DEFECT
摘要目的 评价转染骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2, BMP-2)基因的骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)复合生物可降解人工骨修复兔桡骨缺损的血管化过程,观察BMP-2基因对促进移植骨血管化的影响. 方法 利用携带BMP-2基因的腺病毒载体(adenovirus carrying BMP-2 gene,Ad-BMP-2)转染MSCs及复合人工骨制备.取新西兰大耳白兔60只制成双侧桡骨中段1.5 cm骨缺损模型,随机分为4组,每组15只(30侧).各组采用不同材料植入缺损,A组:Ad-BMP-2转染MSCs+聚乳酸/聚己内酯(polylactic acid/polycaprolactone,PLA/PCL);B组:β-半乳糖酐酶基因的重组腺病毒转染MSCs+PLA/PCL;C组:未转染MSCs+PLA/PCL;D组:单纯PLA/PCL.分别于术后4、8和12周各组处死5只动物,行X线片、微血管分布、组织学、透射电镜观察,并行血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达检测及微血管计数. 结果 A组4周时见移植骨内片状成骨影,有较多新生血管长入,支架孔隙内充满软骨痂,功能活跃的成骨细胞围绕微血管生长,VEGF表达及微血管数均明显高于其它各组,且差异有统计学意义(P<0.01);8周时移植骨内成骨逐渐增多,微血管迂曲扩张并相互连接,软骨痂转变为小梁骨;12周时皮质骨连续,髓腔再通,微血管呈规则地纵向排列.B、C组成骨能力较弱,血管再生缓慢,12周时骨缺损得到初步修复,微血管沿新生骨小梁孔隙分布.D组各时间点新生血管少见,12周时骨端硬化,缺损区被纤维组织填充. 结论 BMP-2基因转染可通过上调VEGF表达,间接诱导移植骨血管化,促进种子细胞成活,加速新骨形成.
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