换一批分化抑制因子1基因对BMP-2促进兔椎间盘软骨终板细胞软骨特性基因表达的影响
EFFECT OF INHIBITOR OF DIFFERENTIATION 1 GENE TRANSFECTION ON BONE MORPHOGENETIC PROTEIN 2 PROMOTING CHONDROGENIC GENE EXPRESSIONS OF RABBIT INTERVERTEBRAL CARTILAGE ENDPLATE CELLS
摘要目的 探讨通过慢病毒干扰细胞分化抑制因子1 (inhibitorof differentiation 1,Id1)基因表达,对BMP-2促进兔椎间盘软骨终板细胞软骨特异性基因Ⅱ型胶原、蛋白多糖表达的影响.方法 取新西兰大白兔椎间盘软骨终板组织分离培养软骨终板细胞,取第2代细胞进行实验.使用绿色荧光蛋白慢病毒、高表达Id1基因慢病毒及RNA干扰(RNA interference,RNAi) Id1基因慢病毒转染椎间盘软骨终板细胞,采用荧光显微镜、实时荧光定量PCR及Western blot法观察慢病毒转染情况以及对细胞Id1基因和蛋白表达的影响.使用上述慢病毒与BMP-2慢病毒共同转染软骨终板细胞,并设置BMP-2慢病毒转染对照,通过实时荧光定量PCR、ELISA法观察Id1基因表达差异对BMP-2促进椎间盘终板软骨细胞合成Ⅱ型胶原和蛋白多糖的影响.结果 慢病毒转染对细胞形态无明显影响,高表达Id1基因和RNAi Id1基因慢病毒能有效转染软骨终板细胞,并干扰内源性Id1基因的表达.BMP-2慢病毒和高表达Id1基因慢病毒共同转染软骨终板细胞后,Ⅱ型胶原、蛋白多糖基因表达和蛋白合成均显著高于BMP-2慢病毒、高表达Id1基因慢病毒单独转染,差异有统计学意义(p＜0.05).Id1基因表达下降后,软骨终板细胞Ⅱ型胶原、蛋白多糖合成明显下调(P＜0.05).结论 Id1基因表达上调能协同BMP-2促进软骨终板细胞Ⅱ型胶原、蛋白多糖表达.
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关键词
BMP-2分化抑制因子1椎间盘软骨终板细胞基因转染兔Bone morphogenetic protein 2Inhibitor of differentiation 1Cartilage endplate cellsGene transfectionRabbit
栏目名称
DOI
10.7507/1002-1892.20150330
发布时间
2016-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金资助项目（(81272039)）
National Natural Science Foundation of China （(81272039)）
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