摘要该文利用高通量测序技术的优点构建了一种MGMT基因甲基化的荧光PCR定性检测方法.该方法提取41例神经胶质瘤石样本基因组DNA并进行亚硫酸氢盐修饰转化,采用高通量测序技术分析样本的亚硫酸氢盐转化效率和MGMT基因CpG位点的甲基化水平,采用荧光PCR技术评估样本MGMT基因的甲基化状态.试验结果如下:样本的基因组DNA平均转化效率达到99.65%;对CpG位点的甲基化水平进行双向聚类分析,筛选出第58号~64号、第66号CpG位点区域用于研发MGMT基因甲基化荧光PCR检测试剂盒.以平均甲基化水平5%为阈值线,采用2种方法检测后发现,有40例样本的结果完全一致.综上所述,借助高通量测序技术成功构建了 MGMT基因甲基化的荧光PCR定性检测方法,该方法适用于临床MGMT基因甲基化状态常规化检测,可以为个体化治疗提供指导.
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