换一批
换一批摘要目的:研究位于H19转录起始点-3390 bp的HhaI位点是否为差异甲基化位点,为精子DNA识别提供新依据.方法:从51份血样和20份精子样本提取基因组DNA,每个样本分别在同一反应体系中进行甲基化敏感酶HhaI消化和荧光定量PCR反应(MSRE-qPCR),扩增包含上述HhaI位点的114 bp片段.得到每个样本酶切前后的Ct值,用2-△△Ct计算各样本酶切前后模板DNA相对表达量,将其作为DNA甲基化水平.结果:51份血样中该HhaI位点甲基化水平为(44.4±23.8)％,20份精子DNA甲基化水平为(120.5±52.5)％,差异有统计学意义(P ＜0.001).结论:甲基化水平高于94％可识剐精子DNA,H19差异甲基化区114 bp序列的MSRE-qPCR分析为精子DNA的识别提供了一种新方法.
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关键词
H19差异甲基化甲基化敏感性限制性内切酶实时定量PCR精子DNAH19 differentially methylationMethylation-sensitive restriction enzymeReal time PCRSperm DNA
分类号
C913.13
栏目名称
性法学
DOI
10.3969/j.issn.1672-1993.2017.01.048
发布时间
2017-04-25
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