miRNA-5582在卵巢癌组织中的表达及对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响
Expression of miRNA-5582 in ovarian cancer tissue and its effect on the proliferation and invasion of ovarian cancer cells
摘要目的 观察微小RNA(miRNA)-5582对卵巢癌SK-OV-3细胞增殖和侵袭的影响并探讨其可能的机制.方法 采用加利福尼亚大学圣克鲁兹分校(UCSC)数据库分析miRNA-5582在卵巢癌组织中的表达及其与卵巢癌患者临床分期的关系.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测卵巢癌细胞株A2780、HO-8910、OC3、SK-OV-3和正常卵巢上皮细胞株IOSE80中miRNA-5582的表达,miRNA-5582表达最低的SK-OV-3细胞株分为对照组和miRNA-5582组,分别转染miR-NC模拟物和miRNA-5582模拟物.MTS法和Transwell实验分别检测SK-OV-3细胞增殖及侵袭.以microRNA.org和miRWalk3.0数据库检索miRNA-5582的靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-5582的靶基因.qRT-PCR和Western blot法检测靶基因表达.结果 miRNA-5582在卵巢癌组织中的表达显著低于正常组织(P<0.01).miRNA-5582表达水平与卵巢癌患者的临床分期呈负相关(P<0.01).miRNA-5582在卵巢癌细胞株中表达均显著低于IOSE80细胞(P<0.05),SK-OV-3细胞中miRNA-5582表达最低(P<0.01).对照组和 miRNA-5582 组的 miRNA-5582 相对表达量为 1.42±0.73 和 10.46±0.91,转染体系构建成功(P<0.01).miRNA-5582组SK-OV-3细胞活性在第3、第4和第5天显著低于对照组(P<0.05).对照组和 miRNA-5582 组侵袭细胞数分别为(49.48±3.78)和(15.77±3.40)个,miRNA-5582组细胞侵袭数量显著少于对照组(P<0.01).miRNA-5582的靶基因是丝氨酸/精氨酸富集剪接因子3(SRSF3)(P<0.01).miRNA-5582 组 SK-OV-3 细胞 SRSF3 基因表达显著低于对照组(P<0.01).结论 miRNA-5582在卵巢癌组织和细胞株中低表达,上调miRNA-5582通过抑制SRSF3基因表达降低卵巢癌SK-OV-3细胞的增殖和侵袭能力,miRNA-5582可能为卵巢癌的防治提供新的靶点.
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