换一批酶消化法分离培养肉鸡肺动脉平滑肌细胞
Isolation and Culture of Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells of Broiler by the Enzymatic Digestion Method
摘要试验旨在探讨胶原酶消化法分离并培养肉鸡肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cell,PASMC)的方法.将1～7日龄雏鸡的肺动脉中膜剪成小于1 mm2的组织块,0.1%Ⅱ型胶原酶消化分离PASMC并进行原代培养和传代培养.倒置显微镜下观察培养细胞的形态,对培养细胞进行HE染色和光学显微镜观察,并采用抗α-肌动蛋白单克隆抗体(α-Smooth muscle actin)免疫组化染色法检测细胞胞浆内α-肌动蛋白的表达,用以鉴定所培养的细胞.结果表明,倒置显微镜下细胞为长梭形,呈典型的"峰-谷"状,未见明显异型细胞.α-actin胞浆染色阳性细胞数占总细胞数的97%以上.因此,胶原酶消化法可用于分离培养肉鸡PASMC,且有方法简单,成活细胞数多、传代周期短的特点,可用于肉鸡心血管疾病如肺动脉高压和肺血管重构的研究工作.
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