换一批水貂肠炎病毒VP2基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达
Expression of VP2 Gene of Mink Enteritis Virus in Baculovrius Expression System
摘要利用昆虫杆状病毒表达系统表达水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV)VP2基因,表达的蛋白能够形成病毒样粒子,具有反应原性,为研究MEV新型疫苗奠定基础.采用PCR方法扩增MEV VP2基因,将PCR产物连接到pMD18-T载体,目的基因定向克隆到pFast-Bac Ⅰ载体中,构建重组转座载体后转化DH10 Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染Sf9昆虫细胞,传毒3代,对表达蛋白进行Western blotting鉴定.结果成功克隆MEV VP2基因.Western blotting结果证实,表达蛋白能够被MEV单克隆抗体识别.在Bac-To-Bac杆状病毒表达系统中成功的表达了MEV VP2蛋白,目的蛋白具有较好的反应原性.
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