换一批摘要本研究采用正交试验法摸索出适于multiple-primer PCR的反应体系中物质成分及其浓度和采用排列组合方法排除干扰引物.结果表明,在10×Buffer(Tris-HC1 100 mmol/L和KCl 500 mmol/L,pH=9.7)2.5μL、DDT为8 mmol/L、dNTP为0.8 mmol/L、MgCl2为2.6 mmol/L、5％甘油、0.25％二甲亚砜和0.5％甲酰胺,Taq酶10 U的25μL的反应体系中,能够成功为总量为32 pmol/L的11对互不影响的微卫星引物进行multiple-primer PCR.通过这种方法,多个微卫星位点可以同时进行PCR,极大地提高了种公牛个体识别与鉴定的工作效率.
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