换一批
换一批摘要本研究从临床发病猪采集病料,以PK15传代细胞进行病毒分离,通过PCR、血液凝集试验(HA)和电镜鉴定为1株猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV),命名为BQ-C.对分离的毒株进行测序,结果显示该毒株与GenBank登录的PPV BQ株同源性为100％.为获得该毒株结构蛋白VP2基因的表达产物,将VP2基因片段插入到原核表达载体pET-30a(+),得到表达重组质粒.经双酶切和测序鉴定,将重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3)中进行表达.SDS-PAGE结果表明,获得的重组蛋白分子质量约为71.5 ku,与预期大小相符.Western blotting结果显示获得的重组蛋白能与PPV阳性血清特异性结合,表明重组蛋白具有良好的反应原性.结果表明,本研究成功分离了1株PPV BQ-C株,且表达的VP2重组蛋白可用于PPV血清学诊断和疫苗的研发.
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关键词
猪细小病毒重组VP2蛋白原核表达反应原性porcine parvovirusrecombinant VP2 proteinprokaryotic expressionimmunoreactivity
分类号
Q786
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1671-7236.2013.11.012
发布时间
2016-05-06
基金项目
国家自然科学基金（31001069、31172349、31172341）
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