换一批
换一批串联表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5表位蛋白间接ELISA方法的建立
Development of an Indirect ELISA Assay for Detecting Antibody to Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus with Recombinant GP5-encoding-epitopes Protein
摘要利用猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5抗原表位串联表达重组蛋白作为包被抗原,建立检测PPRSV抗体的间接ELISA方法.重组蛋白最佳包被浓度为7.5 μg/mL,最佳封闭液为5％脱脂奶粉,37℃封闭2h;血清最适稀释度为1∶100,37℃作用2h;兔抗猪IgG/辣根酶(HRP)(1∶3000),37℃作用2h;37℃避光显色15 min读取D450nm值.结果经统计学分析得出,S/P值≥0.254为阳性,S/P值≤0.212为阴性.所建立的ELISA方法检测其他5种猪常见病原阳性血清,其D450nm值均小于0.212.利用建立的ELISA方法对临床免疫勃林格殷格翰猪繁殖与呼吸综合征活疫苗4周后的猪血清70份进行检测,其D450nm值均大于0.85,表明本研究建立的重组GP5表位蛋白间接ELISA方法可用于临床样品的监测.
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒重组GP5表位蛋白间接ELISAporcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV)recombinant GP5-encoding-epitopes proteinindirect ELISA
分类号
Q78
栏目名称
发布时间
2016-05-06
基金项目
福建省财政专项——福建省农业科学院创新团队建设项目（STIF-Y02）；
福建省农科院青年人才科技创新基金（2012DQB-6）
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